간흡충 asparaginyl endopeptidase의 특성분석

초록

Asparaginyl emdopeptidase(AEP: EC 3.4.22.34)는 clan CD, family C13에 속하는 시스테인 단백질분해효소이다. 이 연구에서는 간흡충의 asparaginyl emdopeptidase(CsAEP)의 특성을 분석하였다. CsAEP는 432개의 아미노산을 암호하며 신호 펩티드와 3개의 N-glycosylation site를 가지고 있었고, 다른 흡충류의 AEPs와 39.1∼76.9%의 상동성을 나타내었다. CsAEP는 산성 pH에서 autocatalytic activation 과정을 거쳐 N-말단 mature enzyme 부위와 C-말단 단편으로 분리되었다. Native CsAEP와 재조합 CsAEP는 유사한 생화학적 특성을 나타내었다. CsAEP는 약산성 및 중성 pH에서 높은 활성을 나타내었으며 pH 6.0에서 최대 활성을 나타내었다. CsAEP 활성은 시스테인 단백질분해효소 억제인자인 E64에 의해 억제되지 않았으나 IAA와 NEM에 의해 억제되었고, 간흡충의 시스테인 단백질분해효소 억제인자인 CsStefins에 의해서 억제되지 않았다. CsAEP는 피낭유충에서 성충에 이르는 다양한 발육단계의 간흡충에서 발현되었고, 간흡충의 장 상피에서 특이적으로 발현되었다. CsAEP는 항원성을 나타내었으며 간흡충 감염 4주 후부터 CsAEP에 대한 특이 항체가 형성되었다. 이상의 결과를 종합하면 CsAEP는 간흡충의 장 상피에서 발현되어 장 내로 분비되는 단백질분해효소 중 하나로 숙주 단백질을 분해하거나 간흡충의 장에서 특이적 발현되는 다른 시스테인 단백질분해효소의 성숙을 매개함으로써 간흡충의 영양대사에서 중요한 기능을 수행하는 것으로 생각된다.