RP-HPLC에서 이동상의 조성에 따른 Deoxyribonucleosides의 거동 특성

초록

HPLC에서 용질에 대한 정확한 mechanism은 그 동안 많은 연구가 이루어졌다. 이러한 mechanism을 이해함으로써 reversed-phase HPLC에서 용질의 retention과 hydrophobic charater를 예상할 수 있다. Liquid chromatography에서 이동상의 조성은 시료와 retention의 관계에 대해서 가장 중요한 영향을 미치기 때문에 이동상의 혼합물의 극성에 대한 연구는 매우 가치가 있으며, 이는 chromatographic strength를 측정하는데 유용하다. Deoxyribonucleosides는 DNA를 구성하는 중요한 성분이고 생존하는 모든 생물에 중요한 역할을 한다. 이들 물질은 강력한 생리학적인 효과를 가지고 있다. 최근에는 HPLC를 이용하여 DNA fragments를 정제하거나 분리하는 기술이 상당히 발전하였다. RP-HPLC에서 retention은 일반적으로 아래와 같은 관계를 가진다. logk'=logk'w-S*F (!) 여기서 k'은 용질의 capacity factor이고 k'w 100% water를 이동상으로 사용했을 때 capacity factor로 외삽법에 의해 구해지며 F는 이동상에서 유기용매의 부피조성(%)이고 S는 주어진 용질과 이동상에서의 상수이다. 여러 논문에서 식(!)에 대한 타당성을 밝혔으며 실험적 오차도 크지 않음을 보여주고 있다. 식(!)에서 slope와 intercept value는 용질의 hydrophobic character의 정도로 간주할 수 있다. 100% water를 이동상으로 사용했을 때의 capacity factor(k'w)가 chromatographic retention을 측정하는데 가장 유용하며, 생물학적 system에서 용질의 hydrophobicity에 대한 좋은 지표가 된다고 한다. 그 동안 일부에서 HPLC에서 deoxyribonucleosides 유도체의 거동과 메탄올 농도에 따른 logk'의 의존성이 연구되어져 왔으나, 이전의 연구는 식(!)에 의한 외삽법으로 k'w를 구했고, 유기용매의 조성이 10% 이상이었다. 따라서 용질의 hydrophobic properties를 결정하는데 종요한 logk'w는 Deoxyribonucleosides에 대하여 정확지 않을 수 있다. 따라서, 본 논문의 목적은 이동상의 두 가지 유기용매 종성에 따른 5가지 Deoxyribonucleosides의 시료에 대해서 column내에서의 거동을 column efficiency와 capacity factor로서 조사하고, 이들에 대하여 hydrophobic parameters인 S와 k'w를 보다 정확히 결정하는 것이다.