비비만성-비인슐린 의존형 당뇨병모델에서

초록

당뇨병이 진행되는 동안 insulin을 생산하는 췌장소도는 당뇨의 유형과 병인에 따라 독특한 변화를 나타내며, 췌장소도를 이루고 있는 내분비세포들의 변화양상은 이때 나타나는 당뇨현상을 이해할 수 있는 중요한 지표가 된다. 본 실험에서는 제Ⅱ형 당뇨병중 비비만성-비인슐린 의존형 당뇨모델에서 췌장내분비세포들의 변화와 당뇨현상을 관찰하고, 췌장소도에서 세포의 사멸 및 증식에 관련되는 물질들의 발현을 분석하였다. 당뇨병 실험동물모델의 제작을 위하여, 출생 후 3일된 흰쥐에 streptozotocin(50 mg/kgㆍ체중)을 1회 복강에 주사하거나(실험군 Ⅰ), 200 g 정도의 흰쥐성체에 streptozotocin(40 mg/kgㆍ체중)을 같은 방법으로 5일간 반복 투여하였다(실험군 Ⅱ). 모든 실험동물의 혈당농도는 매일 측정되었으며, 이 중 200 mg/dl 이상의 혈당농도를 보이는 동물에는 insulin을 주사하였다. 최종 약물투여 후 1, 2, 3, 4 및 5주 후에 실험동물에서 췌장조직을 적출하여 insulin, glucagon 및 clusterin과 B/K 단백질(Brain/Kidney protein)의 검출을 위한 면역염색화학법을 시행하였다. 실험군 Ⅰ, 즉 갓 태어난 흰쥐에 streptozotocin을 처리한 동물의 췌장소도는 성장형태가 정상동물의 췌장과 비슷하였으나, 베타세포의 수는 전기간 동안 정상동물의 췌장 보다 약간 감소되었다. 이들 베타세포의 insulin면역반응성은 초기(1-3주)에는 매우 미약하였으며, 4주 이후부터 다소 증가되었으나, 같은 시기의 정상 동물보다는 현저하게 미약하였다. Glucagon(α) 세포는 초기(1-3주)에 정상동물 췌장에 비해 세포수가 감소되는 현상을 보였으나 3주 이후부터는 증가되기 시작하였고, 4주 이후에는 정상동물의 것보다 많이 관찰되었다. 이들의 glucagon면역반응성은 매우 강하였으며, clusterin과 B/K에도 양성반응을 나타냈다. 실험군 Ⅱ, 즉, 성체에 저농도의 streptozotocin을 반복 투여한 동물에서의 베타세포는 실험초기(1-2주)동안 세포사멸로 인하여 급격히 감소하였지만, 3주 이후부터 약간의 증가 현상이 관찰되었으나 정상 동물의 것에 비해 훨씬 적었으며, insulin면역반응성도 매우 미약하였다. 이에 비하여 glucagon 세포는 1-2주에 정상 동물에 비해 감소된 양상을 나타냈으나, 3주부터는 세포증식이 시작되어 4주에는 정상동물 보다 더 많이 분포되어 있었고, 이들은 모두 clusterin과 B/K에도 비슷한 면