제조용 액체 크로마토그래피를 이용한 taxol 분리공정의 개발 (II)

초록

항암제로서 탁월한 성능이 임상학적으로 증명된 taxol ( Paclitaxel ) 은 세포배양, 합성법 뿐만 아니라 제한된 천연물질로부터 분리·추출되고 있는데, 주요 공급원은 주목나무로부터의 추출물을 제조용 액체 크로마토그래피의 흡착특성을 이용하여 정제하는 것이다. 주목나무로부터 taxol을 분리 정제하기 위하여 본 연구에서는 용매를 사용하여 추출하고 분배과정을 거쳐 농축하였고, 농축액에 잔존하는 lipid, pigment등의 불순물을 제거하기 위해서 전처리 단계에서 open column을 사용하였다. Open column에서는 silica를 충진하였고 이동상의 조성을 조합하며 실험하였다.1) 본 고순도분리연구실에서는 주목나무 추출물로부터 taxol을 분리하는 연구를 정상 및 역상 액체 크로마토그래피를 이용하여 수행하였다.1,2) 역상에서의 실험 결과로부터 분리도와 이동상조성의 관계를 나타내는 실험상관식을 구하였고 이 실험상관식으로부터 이동상의 최적범위를 분리도와 분리시간을 기준으로 정하고 실제 실험에 적용하여 실제 주목나무 추출물에서 taxol을 분리하는데 이용하였다.2) 크로마토그래피 내에서 흡착되는 물질과 흡착제와의 상관관계를 나타내는 흡착평형식을 계 산하는 과정은 제조용 분리공정에서는 매우 중요하다. 본 연구에서는 또한 주목나무의 추출 물로부터 얻어진 순수한 taxol을 제조용 규모의 액체 크로마토그래피에서 분리하여 taxol의 흡착평형식을 구하였다. 또한 이전에 얻은 분리조건을 이용하여 제조용 규모에서 이동상의 조성을 최적화하였다. 정 상조업에서 silica column을 사용하여 hexane, methanol, IPA을 이동상으로 사용하여 종류 와 조성에 따라 많은 양의 taxol을 분리하기 위한 조건을 구하였다. 역상 HPLC에 의한 taxol분리는 문헌에 자주 등장하고 있지만 정상 HPLC에 대해서는 상대적으로 적다. 향후 taxol에 대한 분리공정을 수행하기 위한 전 단계로서 본 연구에서는 제조용 silica를 사용하 여 이동상의 조성을 최적화하고 이 조건에서 최대 가능한 시료 양을 정량적으로 고찰하고자 한다.