국내 환자로 부터 Bartonella henselae 분리 배양

초록

Bartonella는 사람에서 고양이긁힘병(cat scratch fever)를 일으키는 인수공통전염병의 원인균이다. 이 중 가장 흔한 감염을 일으키는 균은 B. henselae이다. ...그러나 국내에서는 아직 Bartonella에 대한 체계적인 연구가 이루어진 적이 없어 이 균의 발생 양상에 관한 자료나 지식이 부족하다. 본 실험에서는 국내 의심 환자로부터 원인균의 분리 및 배양을 시도하여 Bartonella를 배양하였다. ...환자의 혈액을 ECV304 세포에 가하여 배양한 결과 세포가 동그랗게 변하고 세포의 단층배양에서 탈락되는 cytopathic effect가 나타나는 양상을 보였다. 이렇게 변화를 보이는 ECV304 세포에서 세균의 증식을 확인하기 위하여 anti-Bartonella antiserum(Focus Diagnostics, USA)의 Bartonella IFA IgG 측정 kit에 포함된 양성 대조 혈청으로 간접항체염색을 시행한 결과, 음성대조혈청의 결과와는 다르게 강하게 형광 염색이 되는 균체를 발견할 수 있었다. 또한 분리 균주는 ECV304 세포에서 배양하였지만, 혈액한천배지에 접종한 후 이산화탄소 배양기에서 배양하면 약 15일 이후에 작은 집락을 형성하는 것을 확인할 수 있었다. 분리 균주의 종을 정확히 동정하기 위하여 유전자 염기 서열을 결정하였다. 16sRNA 염기 서열을 결정하여 위해 논문(JCM 35: 2733-2739)에 기술된 BAK11w와 PC3mod primer를 사용하였고, 16s/23s rRNA Intergenic Spacer Region의 염기 서열 결정을 위해서는 논문(JCM 39: 2768-2778)에 기술된 16SF와 23S1 primer를 사용하였다. 염기서열로 Pubmed의 Blast search를 시행한 결과 B. henselae와 가장 상동성을 나타내어, 분리 균주의 균종을 확인할 수 있었다. 이상의 결과는 국내에서는 최초로 B. henselae를 배양하여 환자를 진단한 예이므로 이를 보고한다