High-Performance Membrane Chromatography에 의한 Oligonucleotides의 분리

초록

High-performance membrane chromatography(HPMC)는 최근 들어 많은 연구가 진행되고 있는 크로마토그래피의 기술 중에 하나이다. Fig. 1에서 보는 바와 같이 현재 가장 효율적인 HPMC 분리 기술에서는 미세공 조직을 가진 박층(thin layer)의 사용과 두께 2-3mm 원형의 Convective Interaction Media(CIM)를 고정상(stationary phase)으로 사용하고 있다. 이러한 기하학 구조의 고정상에서 membrane adsorption (MA)에 의해 분자들의 분리가 일어난다. 기존의 High-Pressure Liquid Chromato- graphy(HPLC)에서는 컬럼에 충전된 흡착제와 이동상간의 확산, 입자사이의 흡착과 탈착의 메커니즘으로 분리가 되는데 비해서 HPMC에서는 흡착제의 작용과는 구별되는 얇은 막을 통해서 쉽게 전달이 되는 것을 이용한다. HPMC는 membrane과 컬럼 크로마토그래피를 결합한 형태의 분리기술 이다. HPMC의 장점은 빠른 분리속도, 낮은 압력강하, 높은 선택도, scale-up이 쉽고, 조작이 간단하며 pH에 무관하게 안정적으로 조업할 수 있다. HPMC의 응용 분야로는 peptides, proteins, oligonucleotides와 polynucleotides 분자들의 정제와 분리, solid-phase extraction, biosensors 등에 대한 분야이다. Nucleotides는 DNA단위를 구성하고 있는 nucleoside의 인산에스테르 이다. Oligonucleotide는 nucleotide를 구조단위로 하는 2∼20정도의 중합체중에서 분자량이 5,000∼10,000인 oligonu- cleotides를 본 실험에서 사용하였다.