RP-HPLC에서 완충용액의 농도에 괸한 체류모델에 관한 연구

초록

Nucleotides는 생명체의 유전 물질인 DNA의 구성물질로 핵산염기, D-ribose, 인산 3종류의 분자가 결합한 핵산을 구성하는 기본단위이다. Nucleotides는 nucleosides의 3'또는 5'에 인산이 에스테르 결합으로 연결된 구조를 가지고 있다. Nucleotide의 유도체중 특히 adenosine-5'-triphosphate (ATP)는 생화학반응에서 중요한 작용을 한다[1]. Reversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography(RP-HPLC)는 용액 상태의 혼합물을 분석하는 대표적인 분석기기로 많은 활용범위가 연구되고 있다[2]. RP-HPLC에서 이동상은 물과 물보다 낮은 극성을 가지는 메탄올, 아세토나이트릴이 주로 사용된다. 이러한 이동상에 용해되는 물질은 주로 극성을 띄거나 용해되어 이온으로 존재한다. 고정상으로 쓰이는 물질은 비극성을 띄는 C18이나 C8을 사용한다. 용해되어 이온으로 존재하는 물질은 매우 큰 극성을 보이기 때문에 비극성인 고정상에 체류하지 않고 바로 용출되어 분석을 어렵게 한다. 이동상의 pH에 따른 시료의 체류거동에 따른 연구는 많은 연구자에 의해서 발표되었다[3]. 그러나 이동상의 pH를 측정하는 것이 매우 어렵고 매 실험마다 동일한 pH를 얻기가 어렵다. 또한 buffer의 종류에 따른 체류거동의 변화를 알 수 없다. 이러한 어려움을 해결하기 위하여 본 연구에서는 이동상의 pH의 변화를 대신하여 이동상 내의 buffer의 농도의 변화에 따른 시료의 체류거동을 예측함으로써 buffer의 농도가 이온성 시료의 체류에 미치는 영향을 연구하여 buffer의 농도에 따른 시료의 체류거동을 규명하는 것이다[4]. 본 연구의 목적은 다섯 가지 nucleotides, cytidine-5'-monophosphate disodium salt (5'-CMP), uridine-5'-monophosphate disodium salt (5'-UMP), guanosine -5'- monophosphate disodium salt (5'-GMP), inosine-5'- mono phosphate disodium salt (5'-IMP), adenosine-5'-monophosphate disodium salt (5'-AMP)의 체류거동을 물 - 메탄올의 이성분계 이동상에 sodium phosphate monobasic 또는 acetic acid를 첨가하여 buffer의 농도에 따른 체류거동을 예측하기 위한 모델식을 구하는 것이다.