Reversed Micelle을 이용한 단백질 추출에서 상간이돋법과 분자체를 이용한 탈수법의 비료

초록

Reversed micelle을 이용한 단백질 추출법은 생물학적 활성을 유지시키면서 빠른 시간내에 선택적인 추출을 해낼 수 있는 장점을 가지고 있다. 따라서 지난 10여년동안 여러 단백질의 추출에 대해 주요 변수로서 pH, 이온 세기가 미치는 영향에 대한 많은 연구가 진행 되었다. 이러한 추출공정은 먼저, 선택적으로 단백질을 reversed miceller phase로 이동시키는 forward transfer와 reversed micelle core안의 단백질을 다시 aqueous phase로 회수해내는 backward transfer의 두 단계로 나눌 수 있다. 이러한 단백질의 이동은 주로 두 상의 접촉에의한 phase transfer method에 의해 이루어진다. Phase transfer method외에 backward transfer 공정에서 silica gel을 reversed micellar phase에 투입하여 reversed micellar core속의 물, 계면활성제, 그리고 단백질을 silica gel에 흡착시켜 단백질을 회수해내는 공정이 발표되었다. 그러나 다량의 계면활성제가 단백질과 함께 흡착되는 단점 때문에 최근에는 4A의 세공 크기를 갖는 Na-A형 분자체를 사용하여 계면활성제는 거의 흡착시키지 않으면서 reversed micellar core 속의 물만을 흡착시켜 단백질을 침전으로 얻는 방법이 보고 되었다. 본 연구는 음이온성 계면활성제인 AOT와 isooctane으로 이루어진 reversed micellar phase를 이용하여 단백질 분해 효소인 a-chymotrypsin을 phase transfer method에 의해 forward transfer시킨 후, backward transfer시에 phase transfer method와 분자체를 이용하여 단백질을 얻어내는 방법에 대해 forward transfer 조건에 따른 각각의 backward transfer efficiency를 비교하였다.