항바이러스 숙주인자 개발을 위한 사람과 쥐의 RNA Lariat Intron Debranching 효소에 대한 연구

초록

RNA lariat debranching 효소 (DBR)는 intron을 갖고있는 진핵세포가 성숙한 mRNA를 형성하기위해 수행하는 mRNA processing 과정에서 intron을 제거하기 위해 꼭 필요한 효소이다. 효모균의 경우 DBR 효소는 intron 제거기능 외에도 Ty1이라는 retrotransposon element의 전이를 저해시키는 기능도 발견되었으며 특히 이 기능은 AIDS, 암등을 유발시키는 retrovirus의 전이를 저해시킬 수 있다는 가능성을 제시해 왔다. 지금까지의 retrovirus에 대한 항바이러스 개발에 대한 연구는 모두 retrovirus 유전자에 대한 연구에 기초를 두었으나 본 연구는 숙주인자를 대상으로한 항바이러스제의 개발을 목표로한 연구로 retrovirus 정복을 위한 새로운 시도로 여겨진다. 사람에서의 DBR (hDBR) 유전자를 클론하기 위해 효모와 선충의 DBR 효소의 아미노산 서열을 기초로한 PCR cloning과 dbEST 유전자 정보은행 data base를 이용한 컴퓨터 clonig을 통해 hDBR 유전자의 단편을 얻었으며 이 단편을 이용한 HeLa cDNA library screening을 통해 2.2 kb 크기의 hDBR 유전자를 완성하였다. 이 hDBR 유전자는 효모의 Sc-dbr1, Sp-dbr1, 선충의 Ce-dbr1 유전자와 매우 높은 유사성을 보였으며 452 아미노산의 단백질을 생성할 수 있는 유전정보를 갖고있었다. 이 유전자의 hDBR 효소로서의 진위성 여부를 확인하기 위해 pGAL expression vector를 이용한 효모에서의 보완성 실험을 한 결과 이 유전자는 효모에서 actin intron을 제거하지 못하는 결과를 얻게되었다. 이러한 결과는 현재의 hDBR 유전자가 완전한 클론이 아님을 시사하는 것으로 5' RACE PCR을 통한 cDNA library의 재조사가 진행 중이다.