토종콩에 함유된 이소플라본의 추출 및 정제

초록

예전부터 생리활성물질 중에서 연구자들에게 관심을 모으는 천연물은 콩으로, 단백질을 함유한 식품중 육식을 많이 하는 현대인들에게 기능성 식품의 원료로 널리 알려졌으며, 그 유용성에 대한 연구가 활발히 진행되었다. 그 중에서 생물학적 활성 물질로 알려진 성분은 isoflavone, sapoin, lecithin, peptides, amino acids등이 있다. 대표적인 콩의 유용한 물질은 항암물질로 많이 알려져 있는 isoflavone이 있으며, 콩 속에는 약 0.2～0.4(W/%) 정도의 isoflavone 성분이 함유되어 있다. 효능 및 효과는 약리학적 활성인 생식계, 인지능력 손상, 갑상선 이상 등에 유용한 목적으로 사용되고 또한 심장 질환, 유방암, 전립선암, 결장암, 골다공증, 폐경기 증상 등에 관련된 유용한 효과를 갖고 있다. Isoflavone의 구성은 비 배당체의 daidzein, genistein, glycitein과 배당체인 daidzin, genistin, glycitin, 6"-O-acetyldaidzin, 6"-O-acetyl-genistin, 6"-O-acetyl-glycitin, 6"-O-malonyldaidzin, 6"-O-malonyl-genistin, 6"-O-malonylglycitin로 이루어져 있다. 메주, 된장 및 간장의 제조과정 중에서 버려지는 토종콩 추출물과 된장 찌꺼기의 부산물에서 isoflavone을 얻기 위하여 분석용과 준제조용 HPLC를 동시에 실험하였고 정제된 추출액을 (RS-Tech OP C18, 5㎛, 0.46 × 25cm) 컬럼을 이용하여 부산물에 포함된 isoflavone을 분리 및 분취할 목적으로 최적의 실험조건을 구하였다. 정제된 isoflavone을 얻기 위하여 추출용매의 종류와 조성(Vol. %), 교반조건 및 추출온도를 실험적으로 확립하여 고순도의 isoflavone을 얻고, 토종콩 추출 용액에서 15㎛ 입자가 충진된 분취용 컬럼(Lichrosopher 100RP-C18, Merck, U.S.A, 0.46 × 25cm)을 사용하였다. 이동상 A는 물/아세토니트릴/아세트산, 94.9/5.0/0.1 (vol.%), 이동상 B는 물/아세토니트릴/아세트산, 5/94.9/0.1 (vol.%)로 만들었으며, 이동상 A/B가 100/0-70/30 (vol.%)으로 유속은 1㎖/min, 주입부피 20㎕, 검출파장 254, 260㎚를 사용하여 isoflavone을 분석하였다. 본 연구에서는 토종콩 추출물에서의 isoflavone을 분석과 된장 부산물에 포함된 isoflavone의 회수를 위하여 유용 물질을 대량 생산하기 위한 상용공정의 기초 자료를 얻고자 하는 것이 목적이다.